1:50~l:800)后,按行进行包被、洗涤。按列分别加入用稀释液1:100稀释的强阳性、弱阳性、阴性参考血清及稀释液(作空白对照),保温,洗涤。加工作浓度酶标抗体,洗涤,加底物显色,加酸终止反应后读取A值。选择强阳性参考血清A值;为0.8左右,阴性参考血清A值<0.1的包被抗原稀释度为工作浓度。?方阵(棋盘)法选择包被抗体和酶标抗体的工作浓度将抗体用包被液稀释为10mg/L、lmg/L、/L三个浓度按行包被,每一个浓度包被三行(每行3孔),分别在每个浓度包被的***、二、三行中分别加入强阳性抗原,弱阳性抗原和阴性对照,将酶标抗抗体用稀释液稀释为1:l000、l:5000、l:10000三个浓度,分别加入每个浓度包被的***、二、三列中。加底物显色,加酸终止反应,分别读取A值。以强阳性抗原液A值在,阴性参考A值<**适条件。据此选择包被抗体和酶标抗体的**佳工作浓度。?二、ELISA**适工作浓度的选择及标准化操作1**适工作浓度的选择?1.1间接法测抗体?????酶标抗体工作浓度的选择:①用IgG进行包被,洗涤。②将酶标IgG用稀释液作一系列稀释后分别加入已包被的孔中,保温、洗涤。③加酸终止反应后,读取吸光度(A)。读取A值在1.0时的酶标抗体稀释度,作为酶标抗体的工作浓度。在酶活性实验中,缓冲液的主要作用是维持实验环境的pH稳定。江苏DPBS缓冲液联系方式
PBS缓冲液,是生物化学研究中使用**为***的一种缓冲液,主要成分为Na2HPO4、KH2PO4、NaCl和KCl,一般作为溶剂,起溶解保护试剂的作用。由于Na2HPO4和KH2PO4有二级解离,缓冲的pH值范围很广,而NaCl和KCl主要作用为增加盐离子浓度。如有需要PBS还可以补加1 mmol/L CaCl2和0.5 mmol/L MgCl2,以提供二价阳离子。
配制方法播报称取8.0g NaCl、0.2g KCl、1.44g Na2HPO4、0.24g KH2PO4溶于800mL蒸馏水中,用HCl调节溶液至7.4,***加蒸馏水定容至1L即可得0.01M PBS缓冲液。作用播报PBS是磷酸缓冲盐溶液的简称,不仅伪狂犬病毒要用它稀释,一般的有活性的生物制剂都要用它来稀释。原因就是它具有盐平衡、可调整的适宜pH缓冲作用,蒸馏水不具有盐平衡作用,可以破坏生物蛋白的结构及生物特性;生理盐水不具有调整pH的作用,对完整的、具有活性的物质不能保证其在**适条件下参与生物反应,所以使用PBS是优先。在细胞培养中,它通常用于洗涤传代培养中的细胞,以及在计数细胞时作为稀释溶液。 [2]PBS也不是***的,有的生物活性物质需要的条件比PBS还要高,就需要在平衡缓冲液中加入更多的成分,维持比较好的条件保证生物活性物质保持其**完整的特性 [1]。 江苏DPBS缓冲液联系方式PBS缓冲液中的磷酸盐和盐水可以维持实验体系的离子强度稳定。
缓冲液的作用和使用注意事项
一、缓冲液的概念缓冲液(Buffersolution)通常是由弱酸及其共轭碱或弱碱及其共轭酸缓冲对所组成的溶液,能够在加入一定量其他物质时减缓pH的改变。以生物实验中**常用的一种缓冲液PBS为例,是由Na2HPO4、KH2PO4组成的缓冲对,在PH5.8-8.0范围内有较强的缓冲能力。二、缓冲液的作用缓冲溶液的作用是在有限的范围内调整溶液的pH值,使待测溶液的酸度符合分析方法所规定的范围。例如,苯酚在碱性介质及铁**钾存在下,可与4-氨基安替比林反应生成橙红色的安替比林染料,为了防止芳香胺类的干扰以pH在10士0.2时**为适宜。为此,就需要在待测溶液中加入氨一氯化钱缓冲溶液调整和控制待测溶液的pH为10.0士0.2。
pbs缓冲液的配制配方是10X的PBS母液,然后再对其母液进行1:10稀释即可获得PBS缓冲液。PBS是磷酸盐缓冲液(PhosphateBufferSaline),是生物学实验室**常用的缓冲液之一。其主要成分包括:氯化钠(NaCl)、氯化钾(KCl)、磷酸氢二钠(Na2HPO4)和磷酸二氢钾(KH2PO4)。配制步骤:清洗干净所需烧杯、转子和量筒,向一个烧杯装少量去离子水(约100ml)并放入一个转子后放在称量天平旁备用;向另一个烧杯装约800ml去离子水并在微波炉或者水浴锅(65°以上均可)中加热。注意:由于实验室所购买的Na2HPO4常常带有二水、七水或者十二水,与之对应的重量分别为1.78g、2.68g、3.58g。向烧杯中加入预热的去离子水,烧杯放置在磁力搅拌器上搅拌溶解。用量筒定容到1L,保存备用。取100ml10X的PBS母液,加入900ml去离子水即可获得pH=7.4的PBS缓冲液(无需用pH计校准PH值)。PBS溶液一般指磷酸缓冲盐溶液,不可以喝。
pH标准液如何正确使用及其主要作用(二)
pH标准液的主要作用是什么? 1、pH测量前标定校准pH计 2、用以检定pH计的准确性,将pH电极插入pH9.18溶液中,检查仪器显示值和标准溶液的pHs值是否一致; 3、在一般精度测量时检查pH计是否需要重新标定。pH计标定并使用后也许会产生漂移或变化,因此在测试前将电极插入与被测溶液比较接近的标准缓冲液中,根据误差大小确定是否需要重新标定。 4、检测pH电极的性能。 在进行pH计校准时,首先需要选择合适的pH缓冲溶液。河北HBSS缓冲液哪个好
pH计校准的正确顺序是:先用pH7.0缓冲溶液校准,再用pH4.0或pH10.0缓冲溶液校准。江苏DPBS缓冲液联系方式
本实用新型涉及fbs缓冲液制备技术领域,具体为一种fbs缓冲液处理装置。背景技术:fetalbovineserum(fbs)胎牛血清,是一种性状、外观浅黄色澄清、无溶血、无异物稍粘稠液体,胎牛血清应取自剖腹产的胎牛,新生牛血清取自出生24小时之内的新生牛,在对新生牛血清进行缓冲液制备处理时,需要将新生牛血清进行搅拌,避免新生牛血清发生凝结,以备下道工序使用,但是现有的处理装置结构复杂,操作不便,密封效果不好,搅拌时会造成血清的流出和污染,而且装置不便于移动,给使用者带来了不便。技术实现要素:本实用新型要解决的技术问题是克服现有的缺陷,提供一种fbs缓冲液处理装置,结构简单,操作方便,密封效果比较好,搅拌时不会造成血清的流出和污染,而且装置便于移动,给使用者带来了便利,可以有效解决背景技术中的问题。为实现上述目的,本实用新型提供如下技术方案:一种fbs缓冲液处理装置,包括固定座、筒体、顶盖和出液斗;固定座:所述固定座底部的四角均设有支腿,所述支腿的底端设有移动单元;筒体:所述筒体设在固定座的上表面,所述筒体上表面的边沿设有法兰,所述法兰的上表面设有密封垫圈二,所述法兰沿圆周方向排列开设有固定孔。江苏DPBS缓冲液联系方式
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