胰蛋白酶试剂同酶速率法测定。胰蛋白酶操作方法同酶速率法测定。胰蛋白酶正常值(1)RIA法:阴性。(2)酶速率法(37℃):十二指肠液:150~600μg/ml胰蛋白酶化验结果临床意义(1)升高:急性胰腺、慢性胰腺(复发期)、胰腺*、肾功能不全等。(2)降低:胰腺外分泌功能不全(慢性胰腺后期)。胰蛋白酶附注急性胰腺时血清胰蛋白酶可上升至正常人的2~400倍,一般在10~15天**正常。胰蛋白酶相关疾病急性胰腺、慢性胰腺、胰腺*[4]胰蛋白酶生物*品说明胰蛋白酶*理作用胰蛋白酶为肽链内切酶,对精氨酸和赖氨酸肽链具有选择性水解作用,可使天然蛋白、变性蛋白、纤维蛋白和黏蛋白等水解为多肽或氨基酸。由于血清中含有非特异性抑肽酶,故胰蛋白酶不会消化正常**,而能分解黏痰、脓性痰等黏性分泌物,能促进***、化疗*物向病灶渗透。胰蛋白酶适应证1.用于脓胸、血胸、外科症、溃疡、创伤性损伤、娄管等所产生的局部水肿、血肿、脓肿。2.用于呼吸道疾患溶解黏痰和脓性痰。3.用于***毒蛇咬伤,曾试用于竹叶青、银环蛇、眼镜蛇、蝮蛇等毒蛇咬伤的各型病人800余例,均获***。胰蛋白酶禁忌证1.肝肾出血、出血倾向及结核性脓肿患者禁用。2.不可用于急性症及出血空腔中。EDTA是乙二胺四乙酸,一种金属螯合剂。上海EDTA胰酶联系方式
胰蛋白酶(Trypsin)简称胰酶,是一种丝氨酸水解酶,能把多肽链中赖氨酸和精氨酸残基中的羧基端切断。在组织细胞的提取、培养,以及体外细胞培养过程中,均会使用到胰蛋白酶消化液,用于水解细胞间蛋白质,使组织或细胞离散成单个细胞。胰酶在37℃pH8.0条件下消化能力**强。常用胰酶工作浓度为0.25%。EDTA可以螯合钙镁离子,胰酶溶液中搭配EDTA使用可以加速细胞间连接蛋白的水解,起到增强消化的效果。酚红是一种pH指示剂,溶液偏碱性时呈紫红色,偏酸性时呈橘红色,近中性时呈粉红色。本产品为0.25%胰蛋白酶消化液,含0.25%胰蛋白酶,溶于Hank’s缓冲液,不含EDTA,无酚红指示剂,经0.22μm过滤除菌。山东国产胰酶是什么变色的胰酶同样能很好的用于细胞的解离,请放心使用。
0.25%胰酶是细胞生物学中常用的一种生物试剂,下面汇总一下胰酶使用过程中常见的一些问题。
胰酶的使用浓度是多少?胰酶浓度:常用0.25%胰酶+0.02%EDTA作为消化液。
胰酶的保存胰酶可在-20℃下保存一年。随着时间延长,胰酶的消化能力减弱。胰酶可分装冻存,在使用前从-20℃冰箱取出。尽量避免在4℃长期保存。胰酶使用的时候要注意什么?(1)在使用胰酶细胞消化液的过程中要特别注意避免消化液被细菌污染。(2)胰酶细胞消化液消化细胞时间不宜过长,否则细胞铺板后生长状况会较差。
胰酶消化贴璧细胞原理胰酶是一种重要的消化酶,它在人体消化过程中起到了关键作用。胰酶主要由胰腺分泌,它能够帮助人体消化食物中的蛋白质、脂肪和碳水化合物等营养物质。而胰酶消化贴壁细胞则是指胰酶在消化过程中与肠道内的贴壁细胞发生作用的机制。胰酶消化贴壁细胞的原理主要包括胰酶的合成、分泌和作用三个过程首先是胰酶的合成。胰酶是由胰腺内的特殊细胞合成的。这些细胞受到胃内食物的刺激后,通过胰腺神经末梢的刺激而开始合成和分泌胰酶。合成的胰酶经过胰管进入小肠。接下来是胰酶的分泌。胰酶的分泌主要通过胰腺分泌液的产生和排泄来实现。当胃内食物通过幽门进入小肠后,小肠壁上的细胞会分泌一种叫做胃腺素的物质,这种物质能够刺激胰腺分泌液的分泌。胰腺分泌液中含有胰酶和其他消化酶,它们经过胰管进入小肠,与食物中的营养物质发生作用。***是胰酶的作用。胰酶主要通过两种方式作用于贴壁细胞。一种方式是直接作用,胰酶直接与贴壁细胞接触并发挥作用。另一种方式是间接作用,胰酶作用于食物中的营养物质,将其分解为小分子物质后再与贴壁细胞发生作用。 胰酶在PH值7.2-8.0的时候,溶液呈淡红色。
1、胰酶是,就是说PBS,注意,尽量不要用水来溶,因为要保持渗透压。2、EDTA的工作液溶度是-,根据细胞消化的难易程度自己调整。EDTA并不是必须的,容易消化的细胞可不加。EDTA对细胞贴壁性有影响,因此使用时要甚重。如果影响贴壁,但消化时必须要用,那么在用完全培养基终止消化后,可离心弃上清,再加完全培养基培养,可去除EDTA。如果对贴壁没影响,那么可不离心。3、EDTA的浓度也是质量体积比。和胰酶一起溶于PBS。4、注意,血清可终止胰酶的作用,但不能终止EDTA的作用,对有些细胞来说,终止消化后的离心是必要的。5、胰酶和EDTA在pH为8左右的时候**易溶解,在配制时可先滴几滴NaOH将pH调至8,注意,胰酶可使溶液变酸,所以要边溶边测pH,随时调整。注意,不可加过量NaOH,否则过碱,细胞会受不了。6、胰酶EDTA相对比较难溶,可用磁力搅拌器,或放入4度冰箱过夜,待溶解后过滤**。7、可配2-3乘的胰酶,这样比较节约时间和滤器,用的时候对上**PBS即可。8、储存液放在-20度冰箱冻存,使用液放在4度,用的时候不要放在27度水浴锅温浴,因为这样会让胰酶很快失效,使用前放在室温下一会。胰酶溶液中的二氧化碳与干冰挥发的二氧化碳可能会极少部分的气体交换。山东国产胰酶是什么
消化使用的胰酶是含EDTA还是不含的?上海EDTA胰酶联系方式
胰蛋白酶**点评胰蛋白酶能使痰、血凝块溶化变稀,易于引流排痰,加速创面愈合净化,促进肉芽**增生,而不损伤正常**,临床上有消消肿功能。[4]胰蛋白酶其他胰蛋白酶细胞培养胰蛋白酶的作用是使细胞间的蛋白质水解从而使细胞离散。不同的**或者细胞对胰酶的作用反应不一样。胰酶分散细胞的活性还与其浓度、温度和作用时间有关,在pH为、温度为37℃时,胰酶溶液的作用能力**强。使用胰酶时,应把握好浓度、温度和时间,以免消化过度造成细胞损伤。因Ca2+、Mg2+和血清、蛋白质可降低胰酶的活性,所以配制胰酶溶液时应选用不含Ca2+、Mg2+的BSS,如:D-Hanks液。终止消化时,可用含有血清培养液或者胰酶**剂终止胰酶对细胞的作用。1.称取胰蛋白酶:按胰蛋白酶液浓度为%,用电子天平准确称取粉剂溶入小烧杯中的双蒸水(若用双蒸水需要调PH到左右)或PBS(D-hanks)液中。搅拌混匀,置于4℃内过夜。2.用注射滤器抽滤消毒:配好的胰酶溶液要在超净台内用注射滤器(微米微孔滤膜)抽滤**。3.分装成小瓶于-20℃保存以备使用可!词条图册更多图册参考资料1.胰蛋白酶.化学品数据库[引用日期2017-05-26].***典**会,***典2010版[M],北京:**医*科技出版社。上海EDTA胰酶联系方式
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