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胰酶操作步骤：
(*供参考) ：1. 吸取培养基，用无菌的PBS、Hanks液或无血清培养液洗涤细胞一次，以除去残余的血清。2. 加入适量的胰蛋白酶消化液，略盖过细胞即可。根据细胞的特性可以增加或减少胰酶用量，室温放置30秒至2分钟。（不同的细胞消化时间有所不同）3. 显微镜下观察，细胞明显收缩，并且肉眼观察培养器皿底部发现细胞的形态发生明显的变化呈白茫状；或者用***吹打细胞发现细胞刚好可以被吹打下来。4. 此时吸除胰酶细胞消化液。加入含血清的完全细胞培养液，吹打下细胞，即可直接用于后续实验。如果发现消化不足，则加入胰酶细胞消化液重新消化。 胰酶细胞消化液含 0.25%胰酶和 0.02%EDTA。天津重组胰酶产品介绍
胰酶中的酚红有哪些作用？酚红在培养基中被用来作为pH指示剂，中性时为红色，酸性时为黄色，碱性时为紫色。研究表明：酚红可以模拟固醇类***（特别是雌***）的作用。为避免固醇类反应，培养细胞尤其是哺乳类细胞时，建议用不含酚红的培养基。由于酚红干扰检测，在做流式细胞检测时，也会使用不含酚红的培养基或者胰酶。图 2. Phenol red test图片来源网络8、在做细胞凋亡检测时，细胞为什么不能用含有EDTA的胰酶消化？Annexin V（膜联蛋白）是Ca2+依赖的蛋白，EDTA会螯合Ca2+从而影响Annexin V，进而影响结果，因此需选用不含EDTA的胰酶。建议放入培养箱中进行消化，时间可以长一点。随时观察细胞情况，避免消化过度；也可使用细胞刮刀将细胞刮下，后用***吹匀，比消化简单，还可避免使用胰酶带来的伤害。天津重组胰酶产品介绍EDTA是乙二胺四乙酸，一种金属螯合剂。
(不含EDTA含酚红)性质、用途与生产工艺背景胰酶又名胰醇素、胰液素。白色或淡黄色无定形粉末。系从各种动物胰脏制取的混合物，主要是蛋白酶、脂酶、淀粉酶。溶于水呈微浑溶液。不溶于醇、醚。有引湿性，遇酸、碱及热即丧失活力，水溶液遇酸、热、重金属或单宁酸时产生沉淀。为助消化药，用于缺乏胰液的***症。也用于皮革工业和纺织印染，主要用于酶法脱毛。将绞碎的猪胰浆经***、提取、沉淀、脱脂、干燥、粉碎而得。简介(不含EDTA含酚红)为细胞培养基，1.不含EDTA含酚红：含酚红，（1：250）溶于HBSS溶液，不含钙镁。-20℃保存。胰(不含EDTA含酚红)含，不含EDTA和酚红，溶于无钙镁平衡盐溶液中，经过滤除菌，可以直接用于培养细胞和组织的消化，通常室温消化2分钟左右就消化下大多数贴壁细胞。使用方法(不含EDTA含酚红)使用说明---贴壁细胞Chemicalbook的消化：a)吸去培养液，用无菌的PBS、Hanks液或无血清培养液洗涤细胞一次，以去除残余的血清。b)加入少量胰蛋白酶消化液，盖过细胞即可，室温放置1-2分钟。不同的细胞消化时间有所不同，对于贴壁牢固的细胞可适当延长消化时间。c)显微镜下观察，细胞明显收缩，并且肉眼观察培养器皿底部发现细胞的形态发生明显的变化。
胰蛋白酶：（Trypsin）为蛋白酶的一种，是从牛、羊、猪的胰脏提取的一种丝氨酸蛋白水解酶。由223个氨基酸残基组成的单链多肽，主要切割赖氨酸和精氨酸羧基端。按干燥品计算，每1mg中胰蛋白酶的活力不得少于2500单位。作用是使细胞间的蛋白质水解从而使细胞离散。不同的组织或者细胞对胰酶的作用反应不一样。胰酶分散细胞的活性还与其浓度、温度和作用时间有关，在pH为、温度为37℃时，胰酶溶液的作用能力**强。使用胰酶时，应把握好浓度、温度和时间，以免消化过度造成细胞损伤。终止消化时，可用含有血清培养液终止胰酶对细胞的作用。有些细胞容易消化（如鸡胚原代成纤维细胞）可用胰酶进行消化，可以不加EDTA。 使用胰酶细胞消化液(不含EDTA)的过程中要特别注意避免消化液被细菌污染。
常用的消化酶有:胰酶：用得**多的是胰酶。一般浓度在0.25-0.5%。作用时间根据干细胞种类、作用温度等因素而变化很大，从几分钟到几十分钟不等。0.25%的胰酶作用于单层贴壁的干细胞，在37度条件下，一般消化1-5分钟就足够了。终止是用血清。主要作用于干细胞间。配制时不能用含钙、镁的平衡液，否则影响活性。保存于-20度。胶原酶：胶原酶是比较少用的，一般是用原代培养时，从组织消化下干细胞。这种方法作用温和，对干细胞损伤较小，但是，价格也较贵。中止同样是用血清。胰酶的质量是影响干细胞的消化的关键因素之一，如果配的比较标准，消化的时候就容易消化，反之就不易消化。还要在你看到消化过头的情况下，如果干细胞下来的比较多了，这时可以连同cmf或pbs加上营养液一起传。营养液中有血清，胰酶遇到血清就会自动终止消化，但这样操作对干细胞是有一定的影响的。对于容易消化的干细胞，加入pbs缓冲液洗去血清或加入胰酶，先中和血清的作用（30s），弃之，再加入适量胰酶作用10s-40s（根据细胞消化的难易程度），弃之，这样依赖残余的胰酶就可将干细胞消化单细胞。消化同种细胞时含EDTA的胰酶消化时间会比不含EDTA时间短。天津重组胰酶产品介绍
有些胰酶溶液里含有酚红作为PH值指示剂。天津重组胰酶产品介绍
胰酶消化细胞的原理首先，胰酶消化细胞的原理涉及到胰腺的分泌。当我们进食后，胃内的食物会刺激胃黏膜释放胃液，同时也会刺激胰腺分泌胰液。胰液中含有多种酶类物质，其中包括胰蛋白酶、胰脂酶和胰淀粉酶等。这些酶类物质会通过胰管进入到小肠内，开始对食物进行消化作用。其次，胰酶消化细胞的原理涉及到酶与底物的结合。胰酶在小肠内与食物中的蛋白质、脂肪和碳水化合物等成分结合，形成酶-底物复合物。胰蛋白酶主要作用于蛋白质，能够将蛋白质分解为氨基酸；胰脂酶主要作用于脂肪，能够将脂肪分解为甘油和脂肪酸；胰淀粉酶主要作用于碳水化合物，能够将淀粉分解为葡萄糖。***，胰酶消化细胞的原理涉及到产物的吸收。经过胰酶的作用，食物中的大分子成分被分解为小分子，这些小分子能够通过肠壁被吸收到血液循环中，为人体提供能量和营养物质。胰酶的作用直接影响着人体对食物的消化和吸收，对维持人体的正常代谢和生理功能至关重要。综上所述，胰酶消化细胞的原理是一个复杂而精密的过程，它涉及到胰腺的分泌、酶与底物的结合以及产物的吸收等环节。胰酶在人体内发挥着重要的作用，它对人体的健康和生命至关重要。因此，我们应该注重保护胰腺的健康，合理饮食。 天津重组胰酶产品介绍
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