[VIP第1年] 指数:3
K+主要分布在细胞内液，细胞内K+对于***某些酶是必需的，并在调节细胞内环境的酸碱平衡上也有极重要意义。Ca2+在细胞外液中的作用是将**内部细胞之间相互粘着，在细胞内参与许多重要的细胞生理活动，如传导、参与肌肉细胞收缩等。在悬浮培养时，为了减少细胞的聚集和附着，要减少Ca2+的浓度。Mg2+是构成细胞间质的重要成分，对于细胞间相互稳定结合有很重要的意义。磷的化合物对细胞物质代谢和生理功能调控有重要作用。其他成分：肽、核苷、嘌呤等。可帮助细胞的克隆化培养及维持某些特殊细胞系的生长。分类低血清细胞培养基概述营养丰富的培养基是维持细胞活性及高密度生长的基础，营养缺乏容易引起细胞凋亡，新生牛血清中所含大部分营养成分可以通过化学成分明确的营养物质如氨基酸维生素等成分组合取代。低血清培养基营养成分大优于基础培养基，*需添加1％～5％新生牛血清，而对细胞生长、增殖、形态、活性和功能没有影响甚至有所改善。在国外低血清培养基早已有之，如Gibco等。但是他们的低血清培养基是在基础培养基中选择性的加入重组胰岛素（recombinantinsulin）、人源转铁蛋白（human(holo)tran-sferrin）以及牛血清白蛋白等，有些还包含一些生长因子。减血清培养基提高了实验的可重复性。陕西RPMI1640培养基进货价
第三节**的代谢与培养基新陈代谢(metabolism)足生物有机体基本的特征之一，是生命活动中一切生化反应的总称。它包括物质的分解和物质的合成过程。**吸收了外界的营养，在酶的作用下将其分解，再在酶的作用下台成**菌体的成分。分解与合成两个过程伴同发生，紧密相关，维持了**细胞的生命，进行**的生长。通过检测**系统及代谢产物的生理，来鉴定**的试验称生化试验。生化试验可分为糖代谢试验、蛋白质代谢试验、盐利用试验和呼吸酶类斌验4种。l.代谢试验①氧化发酵试验O-F；②糖（醇）类发酵试验；③VP和甲基红试验2.蛋白质代谢试验①蛋白水解试验；②硫化氢试验；③吲哚试验；④脱羧酶试验；③脱氨试验；⑥尿素酶试验。3.盐类代谢试验①枸橼酸盐试验；②丙二酸盐利用试验；③硝酸盐还原试验4．呼吸酶类试验①氧化酶试验；②细胞色素氧化酶试验表IMVIC试验对肠杆菌属的鉴别作用菌名吲哚（I）甲基红（M）VP（Vi）枸橼酸盐。西藏基础培养基常用知识F12培养基在组织工程和再生医学中有广泛应用。
一）、实验室种子培养基**方法1、高压蒸汽**锅、手提式**锅。容量小。2、立式或卧式**锅。容量较大，一般能装几十瓶或几百瓶。3、**柜。要和蒸汽锅炉配套，用于大量种瓶培养基的**，一次能装几百至几千瓶(袋)。（二）、培养基的分批**1、定义：将配制好的培养基输入发酵罐中，用蒸汽加热，使培养基和设备同时**的一种**方式，又称实罐**。2、**过程过程包括升温、保温和冷却等三个阶段，各阶段对**的贡献：20%、75%、5%。培养基的升温可由两种方式实现：间接加热，在夹套或蛇管中通入蒸汽加热；直接加热，在培养基中直接通入热蒸汽加热。**过程中加热和保温阶段的**作用是主要的，而冷却阶段的**作用是次要的，一般很小，可以忽略不计。此外，还应指出的是，应当避免长时间的加热阶段，因为加热时间过长，不仅破坏营养物质，而且也有可能引起培养液中某些有害物质的生成，从而影响培养过程的顺利进行。在实际生产中，也可能遇到所供蒸汽不足、温度不够高的情况，这时可以适当延长**时间。生产上甚至有用100℃蒸煮而达到彻底**的实例。如要做固体曲而没有高温蒸汽时，可将原料用100蒸汽蒸30min，杀死其中的营养细胞，但孢子与**的芽孢没有被杀死。
C）大肠埃希菌＋＋－－产气肠杆菌－－＋＋志贺菌属－＋－－沙门菌属－＋－＋表硫化氢和尿素酶试验对肠杆菌属的鉴别试验伤寒沙门菌甲型副伤寒沙门菌变形杆菌志贺菌属大肠埃希菌克雷伯菌属硫化氢试验－/＋＋＋＋＋＋＋－－－尿素酶试验－－＋－－＋乳糖发酵试验－－－－＋＋在培养基中加入指示剂或某种化学物质**不需要的**生长，利于需要的**分离，这种培养基称为选择性培养基。常用的抑菌剂有胆盐、煌绿、玫瑰红钠、亚硒酸钠等。常用的指示荆有溴甲酚紫、溴麝香草酚蓝等。美蓝是氧化还原指示剂。例如，在培养基内加入青霉素可**革兰阳性**，而利于革兰阴性**的生长；如果加入链霉素，则可获得与加青霉素相反的选择效果；加入制霉素可*****，有利于**的分离。又如亚**铋琼脂，既能**革兰阳性**生长，又能**许多革兰阴性**生长，但伤寒沙门菌却能在这个培养基上生长出具有棕色环的菌落。SS琼脂是临床**检验中一种常用的选择性培养基。大肠埃希菌在SS培养基上，因发酵乳糖而产酸，使指示剂中性红变深，并使胆盐沉淀，所以菌落红色而不透明。沙门菌分解含硫氨基酸而产生硫化氢，硫化氢与枸橼酸铁形成硫化铁，所以菌落中心呈黑色。痢疾志贺菌，既不发酵乳糖也不产生硫化氧。F12培养基确保了实验结果的一致性和可靠性。
生产上一般采用冷水喷淋冷却，冷却到40-50℃后，输送到预先已经**过的罐内。（四）、间歇**与连续**的比较1、歇**的***和缺点***是设备要求低，不需另外设置加热、冷却装置；操作要求低，适于手动操作，适合于小批量生产规模；适合于含有大量固体物质的培养基的**。缺点是培养基的营养物质损失较多，**后培养基的质量下降；需进行反复的加热和冷却，能耗较高；不适合于大规模生产过程的**；发酵罐的利用率较低。2、连续**的***和缺点***是**温度高，可减少培养基中营养物质的损失；操作条件恒定，**质量稳定；易于实现管道化和自控操作；避免了复的加热和冷却，提高了热的利用率；发酵设备利用率高。缺点是对设备的要求高，需另外设置加热、冷却装置；操作较麻烦；染菌的机会较多；不适合于含大量固体物料的**；对蒸汽的要求高。由此可见，无论在理论上或者在实践上，与间歇**过程相比，连续**的***十分明显。因此，连续**越来越多地被用培养基的**。MEM培养基含有多种必需氨基酸和维生素，适合细胞培养。西藏基础培养基常用知识
无酚红培养基避免了酚红对细胞的潜在毒性作用。陕西RPMI1640培养基进货价
从而使培养基的预热、加热**及冷却过程可在同一设备内完成。该流程的加热和冷却时间比喷射加热连续**流程要长些，但由于在培养基的预热过程同时也起到了**后培养基的冷却，因而节约了蒸汽和冷却水的用量。（2）蒸汽直接喷射型的连续**系统流程中采用了蒸汽喷射器，它使培养液与高温蒸汽直接接触，从而在短时间内可将培养液急速升温至预定的**温度然后在该温度下维持一段时间**，**后的培养基通过一膨胀阀进入真空冷却器急速冷却，从图中可以看出，由于该流程中培养基受热时间短，营养物质的损失也就不很严重，同时该流程保证了培养基物料**先出，避免了过热或**不彻底等现象。（3）由连消塔、维持罐和喷淋冷却组成的**系统连续**的基本设备一般包括：①配料预热罐，将配制好的料液预热到60-70℃，以避免连续**时由于料液与蒸汽温度过大而产生水汽撞击声；②连消塔，连消塔的作用主要是使高温蒸汽与料液迅速接触混和，并使料液的温度很快升高到**温度（126-132）℃；③维持罐，连消塔加热的时间很短，光靠这段时间的**是不够的，维持罐的作用是使料液在**温度下保持5-7min，以达到**的目的；④冷却管，从维持罐出来的料液要经过冷却排管进行冷却。陕西RPMI1640培养基进货价
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