附图说明图1是1/2cs和1/2ms两种培养基上,哥伦比亚型拟南芥无菌苗培养的对比效果图,a:无菌苗在培养基中生长情况;b:无菌苗莲座叶及根系发育;c:萌发率;d主根长度;a和b中bar=;图2是1/2cs和1/2ms两种培养基上,兰兹贝格型拟南芥无菌植株培养的对比效果图,a:无菌植株在培养基中生长情况;b:无菌植株地上部分及根系发育;c:无菌植株花***发育(左)和花粉的亚历山大染色(右);d:主根长度;e:株高;f:莲座叶长度;g:成熟花粉活力;a中bar=、b中bar=、c中花***bar=、c中花粉bar=15um;图3是1/2cs和1/2ms两种培养基上,油菜无菌苗培养的对比效果图,a:无菌植株在培养基中生长情况;b:无菌苗地上部分及根系发育;c:茎高;d:茎中粗;e:主根长;f:大于;a中bar=、b中bar=;图4是1/2cs和1/2ms两种培养基上,马铃薯无菌苗培养的对比效果图,a:无菌植株在培养基中生长情况;b:无菌苗地上部分及根系发育;c:茎高;d:茎中粗;e:根数;a和b中bar=;图5是cs和ms两种培养基上,哥伦比亚型拟南芥叶片及根愈伤**诱导的对比效果图,a:叶片愈伤**;b:叶片愈伤**诱导率;c:根愈伤**;d:根愈伤**诱导率;a和c中bar=;图6是cs和ms两种培养基上。使用减血清培养基能减少细胞应激反应。吉林减血清培养基哪家好

7)溶液应在2℃-8℃下避光保存。具体使用方法参照培养基包装袋上的说明书。2)配制可高压**细胞培养基(1)根据所需将培养基全部倒入一容器中,用少量注射用水(20℃~30℃)将袋内残留培养基洗下,并入容器。加注射用水至总体积的95%,轻微搅拌溶解。(2)在121℃、15psi下**15分钟。(3)待溶液冷却至室温,加入无菌mol/LL-谷氨酰胺溶液规定体积、无菌%(w/v)碳酸氢钠溶液规定体积,加注射用水(20℃~30℃)至规定体积,混匀。(4)如果必要,用1mol/L氢氧化钠溶液或1mol/L盐酸溶液调pH至所需值。(5)溶液应在2℃-8℃下避光保存。具体使用方法参照培养基包装袋上的说明书。注意事项1)细胞培养用水一般为三蒸水(经石英蒸馏器蒸馏)或超纯水,医*生产上一般为注射用水。2)建议尽量选择与所用量相匹配的包装一次使用,因为包装一旦打开,组分可能会变质或因受潮而结团。3)溶解干粉培养基时先加入终体积90%-95%的培养用水,添加剂加完后再补足。4)如需添加的组分较多时,某一组分完全溶解后,再添加另一组分。5)待培养基完全溶解后再加入碳酸氢钠,以免产生沉淀。6)所有成分完全溶解后,培养基应立即过滤或高压**,以免产生沉淀或有微生物污染。7)在过滤**时。陕西RPMI1640培养基进货价无血清培养基适用于敏感细胞系的培养和研究。

将未发生霉变的带有胚的一半种子用于愈伤**诱导实验;b、**消毒:于无菌环境下,将挑选的种子置于无菌三角瓶中,用无菌水清洗3-5次,75%酒精摇动清洗5min,无菌水清洗3-5次,5%naclo浸泡30min(期间每隔5-10min摇动30s),清水洗3-5次,种子表面的无菌水可用干燥的无菌滤纸吸去。(2)配制诱导培养基:cs基本培养基+,用超纯水溶解,。cs基本培养基的成分及用量如表1所示。(3)愈伤**的诱导方法:用弯头镊子将无菌种子的缺口一端倾斜插入cs水稻成熟胚愈伤**诱导培养基,胚贴于培养基表面;于温度24-26℃、湿度50-70%、光照强度1500-2500lux、光照和黑暗交替(光照时间16h、黑暗时间8h)条件下培养。(4)cs诱导培养基的诱导结果为:水稻成熟胚愈伤**诱导时,经cs诱导培养基诱导培养12-14d产生大量淡黄色结构致密的团状愈伤**,出愈率为100%。如图7所示。对比培养例7:将cs基本培养基替换为ms基本培养基,其余完全同培养实例7,ms基本培养基的成分及用量如表1所示。ms诱导培养基的诱导结果为:水稻成熟胚愈伤**诱导时,经ms诱导培养基诱导培养12-14d产生大量淡黄色结构致密的团状愈伤**,出愈率为100%。如图7所示。
培养实例7和对比培养例7的诱导结果比较::用上述方法进行水稻成熟胚愈伤**诱导时,cs诱导培养基与ms诱导培养基诱导出的愈伤**形态大小均相近,出愈率均为100%。如图7所示。培养实例8:液体培养基在植物水培中的应用(1)用不同ph的超纯水配制的液体培养基ph值稳定性比较:a、用不同ph的超纯水配制液体培养基:通常多种因素会导致相同超纯水制水机产出的超纯水ph变动较大,ph通常为。分别选取ph为、、、、、,分别配制ms液体培养基、cs液体培养基、1/2ms液体培养基、1/2cs液体培养基,制作方法为:ms液体培养基为取ms基本培养基置于不同ph的超纯水中溶解并定容至1l;cs液体培养基为取cs基本培养基置于不同ph的超纯水中溶解并定容至1l;1/2ms液体培养基为取1/2ms基本培养基置于不同ph的超纯水中溶解并定容至1l;1/2cs液体培养基为取1/2cs基本培养基置于不同ph的超纯水中溶解并定容至1l。b、结果为:用ph为,ms液体培养基ph为,cs液体培养基ph为,1/2ms液体培养基ph为,1/2cs液体培养基ph为。植物**适宜生长的ph一般为,观察可知,ms液体培养基及1/2ms液体培养基的ph偏酸性且波动较大,其应用于液体培养基时通常需要调节ph,过程繁琐,相比之下。减血清培养基减少了血清对细胞培养的干扰。

在工作台上把已经冲洗干净的外植体浸入75%酒精中消毒30s,用无菌水冲洗3~4次,使用白猫漂白水和无菌水按1:4的体积比配制消毒液,将外植体放入消毒液浸泡40min。通过采用上述技术方案,这种方式对外植体消毒方法简单,能够**降低外植体的死亡率,消毒成活率较高。本发明在一较佳示例中可以进一步配置为:在s1中,外植体选择为**绣球的枝芽饱满的半木质化枝条茎尖部分。综上所述,本发明包括以下至少一种有益技术效果:本发明通过液体**培养技术,以芽为原材料,获取方便,增殖倍率高达8~10倍,生根率达到95%以上,苗木规格整齐,性状保持稳定,同时节省成本,适合工厂化大规模生产质量绣球种苗。附图说明图1是绣球的液体培养基组培快繁方法的流程示意图。具体实施方式以下结合附图对本发明作进一步详细说明。实施例:参照图1,为本发明公开的一种绣球的液体培养基组培快繁方法,具体步骤如下:(一)、试验材料:供试材料采自江苏东郁植物科技有限公司苗圃的**绣球,品种为无尽夏(endlesssummer“bloomstruck”),外植体选用当年生枝芽饱满的半木质化枝条茎尖部分。(二)、试验方法:绣球**培养过程按以下步骤进行:初代培养、继代培养、生根培养。。无血清培养基适用于需要无血清环境的细胞。陕西RPMI1640培养基进货价
DMEM培养基适用于多种哺乳动物细胞的体外培养和实验研究。吉林减血清培养基哪家好
平衡盐溶液(balancedsaltsolution,BSS)简称盐溶液,集缓冲液的缓冲能力、生理盐水的等渗性以及培养液的营养供应特点于一体,兼具维持渗透压、缓冲和调节溶液的酸碱度、同时供给细胞生存所必需的能量和无机离子成分的作用。各种BSS的缓冲系统有所不同,其中以Hank’s液和Earle’s液为例,它们主要差别在于碳酸氢钠的水平,在Earle’s(g/L)中比在Hank’s(g/L)中高。碳酸氢钠需用高水平的CO2平衡,以维持溶液的pH值。Eagles液在空气水平的CO2中,溶液会变碱,Hank’s液在CO2培养箱中会变酸。如果希望在CO2培养箱中保存**,需要用Earle’s液,。如果**是清洗将要在细胞培养基中储存的**,用Hank’s液就可以了。表3-1几种常用的平衡盐溶液配方(g/L)一些BSS含有的Ca2+、Mg2+是细胞膜的重要组成成分,同时参与许多重要的细胞功能活动。但它们有使细胞凝集的作用,在配制分散细胞的消化液和特殊用途的细胞洗涤时,宜采用Ca2+、Mg2+含量较低的Dulbecco液或无Ca2+、Mg2+的D-Hanks液,或者PBS液。概述基础细胞培养基主要包括199、MEM、RPMI-1640、DMEM、DMEM/F12等。主要成分是氨基酸、维生素、碳水化合物、无机盐和其它一些辅助物质。吉林减血清培养基哪家好
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