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另外，酚红作为pH值的指示剂被加入到细胞培养基中。酚红在产物纯化过程中会造成干扰，并且具有一定的固醇类***样作用，如雌***样作用。当用于哺乳类动物细胞的培养，可能会发生一些固醇类反应。现在商业化细胞培养基中的酚红含量可根据需求调整。因生物反应器具有pH在线检测技术，生物反应器培养动物细胞时，酚红可完全去除。细胞保护剂是保护细胞免受渗透压变化、剪切力、氧化及气泡作用等引起的损伤的物质。在使用生物反应器培养动物细胞时，细胞易被机械搅拌和通气鼓泡产生的流体剪切力和气泡作用所伤害甚至破损死亡。为降低这种损伤，除优化生物反应器结构和生产工艺外，可在细胞培养液中添加一些保护剂。其主要是通过改变细胞培养基物性或是对细胞具有保护作用的物质，常用的种类有血清、白蛋白、聚已二醇（PEG）、非离子性表面活性剂PluronicF68或是其他一些高分子聚合物等。3.细胞培养基的理化性质动物细胞在细胞培养基中不仅能存活，还要分裂增殖，合适的渗透压、pH值等理化性质是细胞培养基必须具备的前提条件。动物细胞大多数需要轻微的碱性条件，适宜pH在～。细胞培养基的pH值通常需经校正的pH计来测定。在细胞生长过程中，随细胞数量的增多和代谢活动的加强。F12培养基在生物医学研究中表现出优越的性能。广西减血清培养基供应商
参与细胞的代谢活动。此外，通过提供钠，K+和Ca2+，帮助细胞调节细胞膜功能。Na+是细胞外液中**主要的阳离子，对维持渗透压的恒定有决定性的作用，还与Cl－共同参与生物电活动、维持水平衡和酸碱平衡等。K+主要分布在细胞内液，对于***某些酶是必需的，并在调节细胞内环境的酸碱平衡上也有极重要意义。Ca2+和Mg2+主要参与信号传导、能量代谢、脂肪酸合成、核糖体稳定和蛋白质合成等多种生理作用。PO43－、SO42－、HCO3－是基质所需阴离子，同时是细胞内电荷的调节者。磷对于细胞的生长、代谢和调控都有重要的作用，含磷的化合物如核酸、磷脂、蛋白质是构成细胞的主要成分，ATP、ADP是能量生成、存储和利用的不可或缺的化合物。上述离子对于细胞的作用各有不同，它们共同构成了细胞赖以生存的渗透压、pH和电化学平衡的微环境，细胞对于某种元素的吸收利用会受到其它元素的干扰，例如培养基中过高的钙离子浓度会使镁和锌的吸收利用受到干扰。因此，在保证培养基中上述离子浓度满足要求以外，还需保证上述离子之间种类和比例的平衡。此外，微量元素如铁、钴、镍、硒、碘、铜、锌、锰、铬、钼、氟等对于细胞生长代谢和产物合成都有促进作用。广西减血清培养基供应商无酚红培养基确保了实验结果的高度准确性。
将未发生霉变的带有胚的一半种子用于愈伤**诱导实验；b、**消毒：于无菌环境下，将挑选的种子置于无菌三角瓶中，用无菌水清洗3-5次，75％酒精摇动清洗5min，无菌水清洗3-5次，5％naclo浸泡30min(期间每隔5-10min摇动30s)，清水洗3-5次，种子表面的无菌水可用干燥的无菌滤纸吸去。(2)配制诱导培养基：cs基本培养基+，用超纯水溶解，。cs基本培养基的成分及用量如表1所示。(3)愈伤**的诱导方法：用弯头镊子将无菌种子的缺口一端倾斜插入cs水稻成熟胚愈伤**诱导培养基，胚贴于培养基表面；于温度24-26℃、湿度50-70％、光照强度1500-2500lux、光照和黑暗交替(光照时间16h、黑暗时间8h)条件下培养。(4)cs诱导培养基的诱导结果为：水稻成熟胚愈伤**诱导时，经cs诱导培养基诱导培养12-14d产生大量淡黄色结构致密的团状愈伤**，出愈率为100％。如图7所示。对比培养例7：将cs基本培养基替换为ms基本培养基，其余完全同培养实例7，ms基本培养基的成分及用量如表1所示。ms诱导培养基的诱导结果为：水稻成熟胚愈伤**诱导时，经ms诱导培养基诱导培养12-14d产生大量淡黄色结构致密的团状愈伤**，出愈率为100％。如图7所示。
3)拟南芥叶片愈伤**的诱导方法：用手术剪刀剪开长势良好的无菌叶片，用镊子将其取出摆放在步骤(1)的诱导培养基中，使伤口接触培养基；于温度23-25℃、湿度50-70％、光照强度1500-2500lux、光照和黑暗交替(光照时间16h、黑暗时间8h)条件下培养。(4)拟南芥根愈伤**的诱导方法：用镊子取出无菌苗的根，用手术剪刀剪开后平铺于步骤(2)的诱导培养基中，培养条件同步骤(3)。(5)cs诱导培养基的诱导结果为：拟南芥叶片愈伤**诱导时，培养6-8d在切口处出现颗粒状愈伤**，培养24-26d获得嫩绿色致密的团块状愈伤**，颗粒状愈伤**诱导率及愈伤**总诱导率均为100％；拟南芥根愈伤**诱导时，培养5-7d在切口处开始出现少量颗粒状愈伤**，培养20-22d获得较大体积的淡黄色松脆型愈伤**，且在愈伤**周围观察到大量致密分布的白毛，颗粒状愈伤**诱导率及愈伤**总诱导率均为100％。如图5所示。对比培养例5：将cs基本培养基替换为ms基本培养基，其余完全同培养实例5，ms基本培养基的成分及用量如表1所示。ms诱导培养基的诱导结果为：拟南芥叶片愈伤**诱导时，培养7-10d在切口处出现颗粒状愈伤**，培养24-26d获得嫩绿色致密的团块状愈伤**，颗粒状愈伤**诱导率及愈伤**总诱导率均为100％。使用减血清培养基可以减少细胞培养中的血清干扰因素。
二氧化碳不断被释放，培养液变酸，pH值发生变化。酚红是细胞培养基中**常用的pH指示剂，但依靠细胞培养基中的酚红等pH指示剂进行判断，需要实验员的经验积累，存在较大的主观性。实际上，个性化细胞培养基或是无血清细胞培养基中酚红含量较少或是不含酚红，只能通过pH计或者pH电极进行pH值的检测，结果更为准确可靠。缓冲能力细胞培养基应具有一定的缓冲能力。细胞培养过程中造成细胞培养液pH波动的主要物质是细胞代谢产生的CO2。在封闭式培养过程中CO2与水结合产生碳酸，细胞培养液pH很快下降；打开培养器具时CO2逸出则会引起pH升高。细胞培养基通常采用NaHCO3-CO2缓冲系统，按下列化学反应方程式调节细胞培养基的pH值：H2O+CO2→H2CO3⇌H++HCO3－NaHCO3⇌Na++HCO3－此外，还有缓冲能力较高的磷酸盐缓冲系统。但碳酸盐缓冲系统的细胞毒性小、成本低，在细胞培养中应用得更为***。另一种较为常用的缓冲液是HEPES（羟乙基哌嗪乙硫磺酸）液，它是一种非离子两性缓冲液，在pH~。高浓度的HEPES可能对细胞**性作用，细胞培养时HEPES的添加浓度一般为10～25mmol/L。渗透压细胞必须生活在等渗的环境中，大多数体外培养的细胞对渗透压有一定耐受性。研究显示。使用减血清培养基能减少细胞应激反应。河北F12培养基技术指导
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