(二)Hanks平衡盐溶液(Hanksbalancedsaltsolutions,HBSS)为了便于保存和减少有关成分的化学反应,此液可配成20倍浓缩液(20×),10倍浓缩液(10×)和5倍浓缩液(5×)的储存液(母液)。现以l0×为例,将其配制方法介绍如下:×母液配制法甲液:取450ml三蒸水依次溶解下列试剂NaCl80gKCl4gMgS04·(含2H20者)待完全溶解后,补足三蒸水至500m1。乙液:取450m1三蒸水依次溶解下列试剂(含12H2O者),补足三蒸水至500ml。、乙液等量用三蒸水稀释10倍,即成使用液。用前高压灭菌。例如配制1000m1Hanks使用液,则取三蒸水900ml加入甲液50m1、乙液50m1混匀,用(115℃)高压灭菌15分钟。临用时,用。3.无钙镁Hanks(calciumandmagnesiumfreeHanksbufferedsaline,CMF-Hanks)液,也称D-Hanks液。D-Hanks与Hanks液的一个主要区别是前者不含钙和镁,常用于配制胰蛋白酶等溶液;而Hanks液*含,不能用于5%C02的环境,若放于C02孵箱中,溶液将迅速变酸,使用时应注意D-Hanks与Hanks液的这些区别。【附】:为配制上述Hanks液,应先配好。配制方法如下:称取,置玻璃研钵中细研,逐渐加入,要记好加NaOH的量,共加至,将研好的酚磺酞液用吸管移入烧瓶中加三蒸水(113℃)高压灭菌15分钟。 平衡盐溶液是集缓冲液的缓冲力、生理盐水的等渗性以及培养液的营养供应特点于一体的。中国澳门无酚红平衡盐溶液答疑解惑
(四)PBS液可配成含0.85%NaCl,pH7.2的PBS(简称pH7.2PBS)。1.PBS贮存液(10×)配法NaCl8.5gKCl0.2gNa2HP04·12H202.85g(或Na2HP04·2H201.13g)KH2P040.27g溶于100ml双蒸水中。2.PBS应用液配法取贮存液50ml加双蒸水450m1即成,经103kPa(121.3℃)15分钟灭菌,置室温或4℃保存备用。除上述三种常用的平衡盐溶液外,尚有其他几种次常用的平衡盐溶液,如低钙镁的Dul-becc。液和无钙镁的D-Hanks液(或CMF-Hanks)等。可用于配制消化液和洗涤细胞(可防止抑制酶活性和致细胞凝聚等)。其成分见表1-5,配制方法可参照上述几种平衡盐溶液的方法进行。宁夏有酚红平衡盐溶液平衡盐溶液PBS磷酸盐缓冲液由于不含有钙离子,不易产生沉淀。
平衡盐溶液配方比例平衡盐溶液的定义、用途和重要性12平衡盐溶液(BalancedSaltSolution,BSS)是一种电解质含量与血浆内含量相仿的盐溶液,用于维持细胞渗透压平衡,保持pH稳定及提供简单的营养。它广泛应用于医学、生物学研究和临床***中,特别是在重度缺水或休克状态下,使用平衡盐溶液可以避免输入过多的氯离子,减少高氯性酸中毒的风险。具体配方乳酸钠和复方氯化钠溶液:1/3的。碳酸氢钠和等渗盐水溶液:1/3的。PBS(磷酸盐缓冲液):,调节pH至。DPBS(无钙镁磷酸盐缓冲液):与PBS相似,但不含有钙镁离子。HEPES缓冲液:,调节pH至。配置步骤准备材料:准备好干净的瓶子、纯水和所需的各种化学试剂。称量试剂:根据配方称量各种试剂。溶解试剂:将称量的试剂加入纯水中,搅拌至完全溶解。调节pH值:使用氢氧化钠或盐酸将溶液的pH值调节至所需范围(如PBS的pH值为)。定容和过滤:将溶液定容至所需体积,并进行高温高压灭菌或通过μm滤膜过滤除菌。储存:将配制好的溶液冷却后,密封保存于4℃冰箱中备用。
Earle液 普通认为Earle液比Hanks液缓冲能力强,但Earle液在不用橡皮塞的容器中需加C02平衡(利用5% C02气体平衡),其配方如下: 1.母液A(10×)配法 NaCl 68.0g KC1 4.0g MgS04·7H20 2.0g NaH2P04·H2O 1.44g 葡萄糖10.0g 双蒸水800ml (0.4%) l00ml 将两者混合即为l0×母液A(900ml)。 2.母液B(l0×)配法 CaC12 2.0g 双蒸水l00ml 将母液A和B分离经67.6kPa(115℃) 15分钟灭菌,待冷后,无菌操作将B液缓缓倒入A液中,并分装,置4℃保存(称Earle储藏液)。 3. 7.5% NaHCO37.5% NaHCO3液的配制是称取NaHC03 15g ,溶于200ml蒸馏水中,高压灭菌后分装,注重用橡皮塞封住瓶口存放。 4.用法液配制法取1份Earle储藏液加9份双蒸水稀释后,塞紧瓶塞,写明标志,经67.6kPa(115℃) 15分钟灭菌,置室温或4℃保存备用。临用时在每l00ml的Earle用法液中加入无菌的7.5% NaHC03 2.9ml(也相当于调至所需pH)。 Earle平衡盐溶液含较高的NaH-C03(2.2g/L),适合于5% C02的培养条件。平衡盐溶液可满足体外实验中组织、细胞的生存和代谢的基本需要。
PBS(phosphatebufferedsolution)即磷酸盐缓冲液,能够提供相对稳定的离子环境和pH缓冲能力,是生物学中经常使用的缓冲盐溶液,用于分子克隆及细胞培养等,pH为,与人体血液等渗,主要成分为磷酸二氢钾、磷酸氢二钠、氯化钠以及氯化钾。中文名【速溶】PBS缓冲液,颗粒外文名PBSBuffer,Lyophilizedpowder意义速溶磷酸缓冲盐溶液目的溶解保护试剂应用领域生物学研究主要成分NaCll:137mM,KCll
PBS缓冲液注意事项:***科研用。
PBS缓冲液的作用是溶解保护试剂。PBS简称磷酸缓冲盐溶液,是生物化学研究中使用**为***的一种缓冲液。 平衡盐溶液主要用途是一些化学实验中不影响实验反应的情况下调节pH值。宁夏有酚红平衡盐溶液
平衡盐溶液PBS不含钙和镁,用于在细胞解离前从培养物中冲洗螯合剂。中国澳门无酚红平衡盐溶液答疑解惑
PBS是磷酸缓冲盐溶液一般作为溶剂,起溶解保护试剂的作用。它是生物化学研究中使用**为***的一种缓冲液,主要成分为Na₂HPO₄、KH₂PO₄、NaCl和KCl。PBS缓冲液不仅伪要用它稀释,一般的有活性的生物制剂都要用它来稀释。由于Na₂HPO₄和KH₂PO₄它们有二级解离,缓冲的pH值范围很广;而NaCl和KCl主要作用为增加盐离子浓度。如有需要PBS还可以补加1mmol/LCaCl₂和mmol/LMgCl₂,以提供双价阳离子。pbs缓冲液的配制方法含-20的(简称为PBS-T)配制方法为:称取磷酸/二氢钾(KH2PO4),磷酸/氢二钠(Na2HPO4·12H2O),氯/化钠(NaCl),lv化钾(KCl),吐温-20,加水。PBS:PhosphateBufferedSalinePBS1L配方:磷酸/二氢钾(KH2PO4):,磷酸/氢二钠(Na2HPO4):,氯/化钠(NaCl):8g,lv化钾(KCl),加去离子水约800mL充分搅拌溶解,然后加入浓盐酸调pH至,**后定容到1Lpbs缓冲液的作用PBS是磷酸缓冲盐溶液的简称,不仅伪要用它稀释,一般的有活性的生物制剂都要用它来稀释。原因就是它具有盐平衡、可调整的适宜pH缓冲作用,蒸馏水不具有盐平衡作用,可以破坏生物蛋白的结构及生物特性;生理盐水不具有调整pH的作用,对完整的、具有活性的物质不能保证其在**适条件下参与生物反应。中国澳门无酚红平衡盐溶液答疑解惑
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