[VIP第1年] 指数:3
K+主要分布在细胞内液，细胞内K+对于***某些酶是必需的，并在调节细胞内环境的酸碱平衡上也有极重要意义。Ca2+在细胞外液中的作用是将**内部细胞之间相互粘着，在细胞内参与许多重要的细胞生理活动，如传导、参与肌肉细胞收缩等。在悬浮培养时，为了减少细胞的聚集和附着，要减少Ca2+的浓度。Mg2+是构成细胞间质的重要成分，对于细胞间相互稳定结合有很重要的意义。磷的化合物对细胞物质代谢和生理功能调控有重要作用。其他成分：肽、核苷、嘌呤等。可帮助细胞的克隆化培养及维持某些特殊细胞系的生长。分类低血清细胞培养基概述营养丰富的培养基是维持细胞活性及高密度生长的基础，营养缺乏容易引起细胞凋亡，新生牛血清中所含大部分营养成分可以通过化学成分明确的营养物质如氨基酸维生素等成分组合取代。低血清培养基营养成分大优于基础培养基，*需添加1％～5％新生牛血清，而对细胞生长、增殖、形态、活性和功能没有影响甚至有所改善。在国外低血清培养基早已有之，如Gibco等。但是他们的低血清培养基是在基础培养基中选择性的加入重组胰岛素（recombinantinsulin）、人源转铁蛋白（human(holo)tran-sferrin）以及牛血清白蛋白等，有些还包含一些生长因子。无酚红培养基减少了酚红对细胞的影响。云南培养基价目表
又能使培养基的破坏降低至比较低的工艺条件。许多实验研究结果表明，培养基在高温**的过程中，其营养成分的破坏在很大程度上可以用一级反应来描述其反应速度：式中—表示营养成分破环的速率，C：表示营养成分的浓度K'：为反应速度常数，1/s，应速度常数K'与温度的关系，可以使用阿累尼乌斯公式表示之：K'=A'exp-△E'/RT……（1）式中——：反应速度常数，1/S：反应的活化能（J/mol）R：气体常数，*J/mol*kT：反应的***温度，k同样，**过程中的反应速度常数也可以用下式表示出：K=A×exp[-E/RT]……（2）（1）、（2）式可以改写成下列形式：lg(k,2/k,1)=E,/R×(1/T1–T2)……（3）lg(k2/k1)=E/R×(1/T1–T2)……（4）（3）（4）的意义是指：反应的温度从T1升高到T2，其反应的速度常数分别从k,1增加到k,2；k1增加到k2；培养基的**过程实际上是营养成分破坏、菌体死亡的两个平行性反应，对于平行性反应，反应温度的提高，其两个平行性反应的速度常数都增加，但增加的幅度（大小）却不同，其比值可以表示为：lg(k2/k1)/lg(k,2/k,1)=E/E,……(5)实验证明：营养成分为破坏的反应的活化能E的值为E,=—*103J/mol；而菌体死亡的活化能E芽孢：E=418*103J/mol。山西DMEM/F12培养基进口使用减血清培养基能减少实验中的血清干扰。
一般情况下应调pH比所需值低～，因过滤**后，pH值会升高约。8）在细胞培养过程中，建议不加或加少量的***，如血清的浓度较低则所加***的量也要相应降低一些。9）建议用1NHCl或1NNaOH来调节培养基的pH，因为用碳酸氢钠来调对培养液的渗透压影响比较大。如下图所示：图6-1MEM培养基（SLM，MD611）在pH值相同情况下所加的碳酸氢钠、氢氧化钠的量及所对应的培养液渗透压图6-2199培养基（MD502）在pH值相同情况下所加的碳酸氢钠、氢氧化钠的量及所对应的培养液渗透压培养基**培养基的**方法主要有两种，高压**及um微孔滤膜过滤**。与过滤相比，高压**的工作强度小，相对便宜，失败率低，但易造成营养成分的流失。高压**某些培养基（如MEM）可进行高压**，例如清大天一的MEM培养基中的MD605、MD609等。其中不含有L-谷氨酰胺和碳酸氢钠，可在高压**后加入。另外可高压的谷氨酸盐（如L-丙氨酰-L-谷氨酰胺）可代替L-谷氨酰胺。为保证高压**的效果，**设备的验证很关键，可高压**的培养基在121℃、15psi，15分钟的条件下完全可达到**效果及营养成分的**小损失，因此不需将**时间延长。过滤**大多数培养基采用～μm孔径的微孔滤膜进行过滤**，并且已成为培养基**的发展方向。
第三节培养基的高压**及效果验证消毒**在医学实践上有着重要意义。它可切断传播途径、控制***扩散造成的危害；也可杀灭物品或器皿上的**，防止医院***；在医学微生物检验的领域中，消毒**是保正***的病原学检验不受外来微生物污染的前提。（一）术语消毒(disinfection)、火菌(sterilization)、抑菌(bacteriostasis)、防腐（antisepsis）和无菌(asepsis)是常用术语。下面就术语概念加以叙述。(1)**。是用适当的物理或化学手段将物品中活的微生物杀灭或除去的方法。本法适用于制剂、原料、辅料及医疗器械等物品的**。（如外科器械、注射器、基础培养基**等。）(2)消毒。是破坏物体上活的病原微生物的方法，但不包括**芽胞和非病原微生物。如用酒精溶液浸泡体温计、新洁尔灭液擦拭检查台等。用于消毒的化学物品称消毒剂(dis-infectant)。一般而言，消毒对象是指物体而不是机体。(3)防腐。直接使用防腐剂(antiseptics)破坏或**活的病原微牛物的方法。如外科手术前碘液擦洗皮肤、双氧水清创伤口或**肥皂清冼双手等。(4)无菌。防止***病原体进入****或物品的操作技术称无菌操作。无菌即为不存在活的微生物。用于消毒**的物理方法有热力、电离辐射、超声波、过滤等。无血清培养基为细胞培养提供了更清晰的背景。
将蒸过的原料置于室温下过夜，未被杀死的孢子便发芽生长，芽孢发育成营养细胞，再30min便可杀死。如此连续反复进行2-3次，亦可达到彻底**的目的。3、分批**的操作分批灭歇是在所用的发酵罐或其他培养装置中进行的，它是在配制罐中配好培养基后，通过**管道输入发酵罐等培养设备中，然后开始**。在进行培养基的间歇**之前，通常先将发酵罐等培养装置的分空气过滤器进行**，并且用空气将分过滤器吹干。开始**时，应先放去夹套或蛇管中的冷水，开启排气管阀，通过空气管向发酵罐内的培养基通入蒸汽进行加热，同时，也可在夹套内通蒸汽进行间接加热。当培养基温度升到70℃左右时，从取样管和放料管向罐内通入蒸汽进一步加热，当温度升至120℃，罐压为1*105Pa（表压）时，打开接种、补料、消泡剂、酸、碱等管道阀门进行排汽，当然在保温过程中，应注意凡在培养基液面下的各种进口管道都应通入蒸汽，而在液面以上的其余各管道则应排放蒸汽，这样才能不留死角，从而保证**彻底。保温结束后，依次关闭各排汽、进汽阀门，待罐内压力低于空气压力后，向罐内通入无菌空气，在夹套或蛇管中通冷水降温，使培养基的温度降到所需的温度，进行下一步的发酵和培养。MEM培养基在细胞实验中表现出高效的稳定性。贵州MEM a培养基价格
MEM培养基常用于多种哺乳动物细胞的体外培养。云南培养基价目表
1/2ms生长培养基的培养结果为：中双11号油菜种子在1/2ms生长培养基上的萌发率为100％，培养9d的幼苗，表现为植株健壮、平均株高为，叶色浓绿，茎秆粗壮、平均茎中粗为，根系发达、平均根数为(>)、平均主根长为。如图3所示。培养实例3和对比培养例3的培养结果比较：中双11号油菜种子在1/2cs生长培养基和1/2ms生长培养基上的萌发率均为100％；在相同条件下培养9d时，与1/2ms生长培养基相比，1/2cs生长培养基中的幼苗长势更佳，其株高、根的数目优于1/2ms生长培养基，茎粗及平均主根长度与1/2ms生长培养基相近。如图3所示。培养实例4：马铃薯无菌苗培养生长培养基配制：1/2cs基本培养基+蔗糖30g/l+植物凝胶8g/l，用超纯水溶解，。1/2cs基本培养基的成分及用量如表1所示。培养方法：以克新18号马铃薯为例，将配制好的1/2cs生长培养基分装于长、宽、高9cm的耐高温培养盒中，选择生长旺盛的马铃薯脱毒苗，于无菌环境下，根据实际需要，用手术剪刀剪取约1cm长的至少带有1个叶芽的茎端或茎段，用弯头镊子将其1/3-1/2长度垂直插入培养基中；于温度22-23℃、湿度50-70％、光照强度2000-3000lux、光照和黑暗交替(光照时间14h、黑暗时间10h)条件下培养。云南培养基价目表
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